Western blotting (Transfer)

Introduction

Western blotting의 Transfer는 Gel에서 분리된 단백질을 전기적 힘을 가하여 Membrane으로 이동하는 과정입니다. 이른바 전기영동 Gel의 사본을 작성하는 느낌입니다. 과정 자체는 간단한 것이지만, Gel에서 Membrane으로 이동할 때 Gel과 Membrane이 밀착되지 않아서 공기가 들어가면 일부 Transfer가 안되거나, 여러 조건으로 인해 효율이 떨어질 수 있습니다. 숙련된 연구자도 만족할만한 Transfer 결과를 얻는 것은 꽤 어렵다고 합니다.

ATTO의 제품을 사용한 Semi-dry 방식의 Western blotting에 대해 소개합니다.

Work flow

PAGE 전기영동 장치는 목적이나 샘플에 따라서 “Gel size”, “Sample comb (검체 수)” 등 조건에 맞춰 선택합니다. 냉각시스템이나 항온화가 필요한 경우는 온도 조절이 가능한 사양의 장치를 선택합니다.

Compact PAGE (6×6 cm gel): 검체(시료)수가 적은 경우, 시간과 시약의 절약. 최단 전기영동 시간 10분
Mini PAGE (9×8 cm gel): 표준사이즈, 다양한 특성에 따른 전기영동 탱크 및 다양한 Sample comb
Wide PAGE (14×8 cm gel): 많은 검체를 한 번에 전기영동 가능, Gel 2장으로 최대 60 sample 검출 가능
Slab PAGE (13×13 cm gel): 큰 사이즈의 PAGE 전기영동이 필요한 경우

ATTO PAGE Line-up

Compact (6×6 cm gel) size

	WSE-1010 cPAGE Ace	WSE-1025 cPAGE Ace Twin

Application	핵산, 단백질, polypeptide 등의 전기영동
Gel size	60 mm (W) x 60 mm (L), thickness: 0.75 mm
Plate size	76 mm (W) x 70 mm (L)
Buffer volume	170 mL (Lower 125 mL, Upper 45 mL) / 1 gel
Number of gels	1 gel	1 or 2 gels
Sample comb	12-well Smiling-less comb
Power supply	전원일체형 (Low/Standard/High 모드)
Precast gel	c-PAGEL / c-PAGEL HR / cp-PAGEL

Mini (9×8 cm gel) size

	WSE-1150 PageRunAce	AE-6530 mPAGE	WSE-1165 Mini-Slab

Application	핵산, 단백질, polypeptide 등의 전기영동
Gel size	90 mm (W) x 80~83 mm (L), thickness: 1 mm
Plate size	120 mm (W) x 102 mm (L)		100~120 mm (W) x max. 102 mm (L)
Buffer volume	Upper 80 mL, Lower 420 mL		Total 400~650 mL
Gel 항온 방식	상하 Buffer의 양면 항온 고속, 고해상도 전기영동 대응
Number of gels	Max. 2 gels
Sample comb	12-well Smiling-less comb
Power supply	전원일체형 (Low/Standard/High 모드)	별도
Precast gel	e-PAGEL / e-PAGEL HR / PAGEL / p-PAGEL

Wide (14×8 cm gel), Slab (13×13 cm gel) size

	WSE-1170 Multi Lane Gel Chamber	AE-6220 Dual Slab Chamber

Application	핵산, 단백질, polypeptide 등의 전기영동
Gel size	140 mm (W) x 80 mm (L), thickness: 1 mm	138 mm (W) x 130 mm (L), thickness: 1 mm or 2 mm
Plate size	160 mm (W) x 100 m (L)	160 mm (W) x 160 mm (L)
Buffer volume	max. 900 mL	max. 930 mL
Gel 항온 방식	상하 Buffer의 양면 항온 고속, 고해상도 전기영동 대응	상부 Buffer의 한쪽 면 항온
Number of gels	max. 2 gels	max. 2 gels
Sample comb	30-well Smiling-less comb	12-well Smiling-less comb
Power supply	별도
Precast gel	m-PAGEL	-

Power supply의 선택

전기영동 장치를 사용하기 위해서는 Power supply (전원장치)가 필요합니다. 장치(Gel) 크기가 커짐엥 따라서 필요한 전압의 용량이 커지므로 참고하십시오.

또한 PAGE 전기영동은 전압(V)의 사양, Agarose 전기영동 또는 Blotting은 전류(A)의 사양이 중요하므로 그에 맞는 사양을 확인하시기 바랍니다.
(〇: 적용, △: 조건에 따라서 적용, ×: 적용 어려움)

	WSE-3100 PowerStation Ghibli I	WSE-3200 PowerStation III	WSE-3500 PowerStation HC	WSE-3400 myPower H300	AE-8155 myPower II 500

Compact/Mini size PAGE	〇	〇	△	〇	〇
Slab size PAGE	〇	〇	×	〇	〇
Cooling PAGE	〇	〇	×	×	△
Sequence gel	×	△	×	×	×
Disc IEF	〇	〇	×	△	△
Plate IEF	△	△	×	×	×
Submerge agarose	〇	〇	△	〇	△
Semi-dry blotting	〇	△	〇	〇	△
High speed Semi-dry blotting	〇	△	〇	△	×
Wet blotting	〇	×	〇	×	×

Western blotting (Transfer)

Introduction

Work flow

ATTO PAGE Line-up

Power supply의 선택

Tips for Electrophoresis