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Tips for AE-1465 EzFastBlot

Operation Video

Operation Guide (For 1 ATTO Mini size gel)

1. Gel과 같은 크기로 Membrane과 ATTO Absorbent paper 4장 (위, 아래 각각 2장씩)을 준비한다.
타사 Filter paper를 사용할 경우, 위, 아래에 filter paper 두께가 각각 1.8 mm 이상이 되도록 여러장을 겹쳐서 준비한다.
Membrane과 Filter paper 크기는 Gel 크기 ± 5 mm가 되도록 한다. Gel과 크기가 유사해야 트랜스퍼 효율이 가장 높습니다.

2. PVDF membrane을 사용할 경우, Methanol에 5~10초 정도 담가서 activation후에 사용한다. (NC membrane의 경우, 이 과정은 생략합니다.)

3. 10X AE-1465 EzFastBlot Transfer buffer 를 DW로 희석한다. (AE-1465 EzFastBlot 5 mL + DW 45 mL)

4. Absorbent paper 4장과 Membrane을 1X EzFastBlot에 적신다.
이 때, Membrane은 5분 이상 충분히 담가준다. (Membrane이 Buffer에 푹 잠기게 담가줍니다.)

5. 위의 그림과 같이 Bubble이 들어가지 않도록 주의하여 트랜스퍼 장치 하부판 (Anode) 위에 Absorbent paper 2장, Membrane, 전기영동한 Gel을 순서대로 올려줍니다.

6. Gel을 올린 후 Roller를 이용하여 가볍게 Rolling하여 Gel과 Membrane이 밀착되도록 한다.

7. Gel 위에 Absorbent paper 2장을 올려준다.

8. Roller를 이용하여 좌우(전기영동 진행방향과 수직방향)로 Rolling하여 Bubble을 제거한다.

9. 상부판 (Cathode)을 올려 닫아준 후, 전원을 연결한다.

10. 25V에서 15분간 트랜스퍼한다.

 

Tips for Western Blotting
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